1530年,朱利亚诺·德拉罗韦雷(Giuliano della
Rovere)被选为教皇,称尤利乌斯二世。他在位期间(1503—1513年)可谓政治和财政上的灾难,但他将佛罗伦萨艺术之都的头衔安到了罗马头上。多纳托·布拉曼特开始重建圣彼得大教堂,米开琪基罗在西斯廷礼拜堂天顶上作画,拉斐尔在绘制教皇房间里的壁画。1513年,尤利乌斯二世逝世。新教皇利奥十世本名乔瓦尼·德美第奇,乃“伟大的洛伦佐”之子。基于共同的理想,拉斐尔同他建立了相当密切的关系。米开朗琪罗继续建造尤利乌斯二世的陵墓。拉斐尔英年早逝(1520年)时恰逢马丁·路德被逐出教会(1521年),后者开启了教会分裂的序幕。在利奥十世逝世(1521年)之后,禁欲主义的荷兰籍教皇阿德里安六世中断了主要的建设项目,考虑拆毁米开朗琪罗在西斯廷礼拜堂里的湿壁画,并任命他的同胞、荷兰人扬·范斯霍勒尔为梵蒂冈文物的监管人。1523年,克雷芒七世当选教皇,立即下令让艺术项目恢复工作。朱利奥·罗马诺完成了第四个梵蒂冈房间,填补了拉斐尔留下的空缺,但他在1524年移居曼托瓦。罗马诺的离去为帕尔米贾尼诺、罗索·菲奥伦蒂诺和雅各布·圣索维诺的到来所平衡。但这一新时期被罗马之劫残忍地打断。